Wasserbeschaffenheit - Anforderungen an die gezielte Amplifikation von Umwelt-DNA (eDNA)- und Umwelt-RNA (eRNA)-Proben mittels Polymerase-Kettenreaktion (PCR)
Kurzreferat
Dieses Dokument gibt Anleitungen zum Nachweis und zur Quantifizierung von Nukleinsäuren (NA) aus Umweltproben mittels Polymerase-Kettenreaktion (PCR). Umweltnukleinsäuren (environmental nucleic acids, eNA) umfassen Umwelt-DNA (eDNA) und Umwelt-RNA (eRNA). Dieses Dokument behandelt die Validierung und Anwendung PCR-basierter Verfahren mit Schwerpunkt auf Makroorganismen. Der Nachweis von Nukleinsäuren mikrobiellen und viralen Ursprungs wird in gesonderten Dokumenten behandelt (ISO/TS 12896; ISO 16099). Dieses Dokument ist speziell für PCR-basierte eDNA-/eRNA-Verfahren zum Nachweis spezifischer Zieltaxa ausgelegt und nicht für den Nachweis von Organismengemeinschaften oder Artengemeinschaften mittels Metabarcoding. Es umfasst die Amplifikation von eNA aus Umweltproben unterschiedlichster Matrizes, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf, Wasser, Luft, Boden bzw. Sediment, Fäkalproben und Sammelproben (Bulk Samples). Zu den beschriebenen Methoden gehören die quantitative PCR (qPCR), die digitale PCR (dPCR) sowie die Reverse-Transkriptions-PCR für den artspezifischen Nachweis. Darüber hinaus beschreibt dieses Dokument die methodischen Kontrollen, die sowohl bei der Entwicklung eines Verfahrens als auch bei dessen Anwendung auf eNA-Proben erforderlich sind. Schließlich legt dieses Dokument Anforderungen an die Berichterstattung und Dokumentation bei der Verfahrensentwicklung sowie bei der Anwendung des Verfahrens fest. Dieses Dokument schließt Verfahrensschritte aus, die vor der PCR stattfinden (z. B. die Extraktion von eDNA), sowie Schritte nach der PCR (z. B. die Interpretation der Ergebnisse im Kontext der Zielsetzung einer Studie).
Beginn
2026-08-17
WI
00230500
Geplante Dokumentnummer
DIN EN ISO 26532
Projektnummer
11905225
Zuständiges nationales Arbeitsgremium
NA 119-09-05-14 AK - eDNA-, DNA- und RNA-Verfahren
Zuständiges europäisches Arbeitsgremium
CEN/TC 230/WG 28 - DNA- und eDNA-Verfahren
